SMART-seq2
MALBAC-seq
ScMeRIP-seq
ScWGBS
sc-G&T-seq

SMART-seq2微量样品转录组测序



服务内容与技术流程


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技术参数:



所需样本要求
1-1000个细胞
推荐测序数据量*
3-8G/sample
10pg-10ng total RNA
项目周期
35
分析内容

1.对原始数据进行去除接头、污染序列及低质量 reads 的处理;

2、数据产出统计及测序数据的成分和质量评估;

3、参考基因组mapping,默认使用GRCh37为参考序列,基因组结构注释文件和功能注释文件默认使用常用GTF文件;

4、基因表达水平分析:

      4.1 基因表达定量分析;

      4.2 样本间PCA分析(≥4个样本)

5、差异表达分析及功能注释(≥2个样本)

6、富集分析

      6.1 差异表达基因的GO生物学功能富集分析;

      6.2 差异表达基因的KEGG信号通路富集分析;

      6.3 差异表达基因的reactome富集分析

7、可变剪切分析与可变剪切事件筛选

8、SNP、InDel分析统计

9、融合基因分析(非标准分析项)


*测序费用与测序数据量相关



优势与应用:

1、解决微量样品转录组测序建库量不够的难题,如流式下来的微量细胞群、穿刺样本、生殖医学研究、激光显微切割单细胞样本等。实现10pg-10ngRNA的高通量测序;

2SMART-seq2测序覆盖mRNA全长信息,相比10X Genomics类高通量单细胞捕获系统只检测mRNA 3末端的~90bp的区域,检出基因数更高、基因结构变化信息更丰富,细胞进行分群更精准;得益于此,它还可以用于分析可变剪接、RNA层面的SNP/InDel、融合基因等信息。

3SMART-seq2属于低通量转录组,结果可靠,可用于10XGenomicsBD等高通单细胞测序后,具体某类细胞群功能深度探究工作。

部分结果展示:













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